常用的组培外植体有哪些?
外植体包括:被培养的组织块--叶片碎片、茎尖、幼胚等或细胞--去壁的叶肉细胞、细胞恢复分裂,形成大量的细胞--愈伤。
这个过程是脱分化。由于是已经成熟的细胞脱离了成熟细胞的状态,回到类似胚胎阶段的状态,故称脱分化。
减少外植体带菌的措施有哪些?
防止材料带菌的措施
(1)用茎尖作外植体时,可在室内或无菌条件下对 枝条先进行预培养。 枝条水洗净插入无糖的营养液或自来水 抽枝以这种新抽的嫩枝条作为外植体 接种。这样便可大大减少材料的污染。 或在无菌条件下对采自田间的枝条进行暗培养,待 抽出徒长的黄化枝条时采枝,经灭菌后接种也可明 显减少污染。
(2)选择合适的时间去田间采取外植体 避免阴雨天去田间采取外植体。 在晴天采取外植体时,下午采取的外植体要比早晨采的污染少,因材料经过日晒后可杀死部分细菌或真菌。
但目前对材料内部污染还没有令人满意的灭菌方法。在菌类长入组织内部时,不但要除去鳞片,甚至要除去韧皮组织,只接种内部的分生组织,以收到一定的防污染效果。
2.外植体的灭菌 (1)多次灭菌法:如咖啡成熟叶片的灭菌即用这种方法。首先除去主脉(因主脉与支脉交界处常有真菌休眠孢子存在),同时去掉叶的顶端、基部和边缘部分,这样可大大减少污染;其次,将切好的外植体放入1.3%的次氯酸盐溶液中(商品漂白粉25%的溶液),灭菌30min;第3,在无菌蒸馏水中冲洗3次;第4,将材料封闭在无菌的培养皿中过夜,保持一定温度;第5,次日将叶片用2.6%次氯酸钠灭菌30min,然后,用蒸馏水洗3次。对层积过的种子也可用多次灭菌法,在种子吸胀前后都要灭菌,在层积贮藏的第一周还应增加1次灭菌处理。
(2)多种药液交替浸泡法
对容易污染而难灭菌的材料: 首先取茎尖、芽或器官外植体,用自来水及肥皂充分洗净,表面不可附着污垢、灰尘,用剪刀修剪掉外植体上无用的部分,剥去芽上鳞片; 第2将材料放入70%—75%医用洒精中灭菌数秒钟; 第3在1:al B(一种商品灭菌剂名)稀释液中浸5min 第4放入5%—10%次氯酸钠溶液中并滴入“吐温80”数滴,灭菌15—30min,或浸入0.1%—0.2%升汞溶液中并加入“吐温80”数滴,灭菌5—10min; 第5,用无菌水冲洗5次。也可以在从次氯酸钠溶液中取出后,再放入无菌的0.1mol盐酸(HCl)中浸片刻,再用无菌水冲洗数次。
3.玻璃器皿的灭菌 湿热灭菌法——即将玻璃器皿包扎后置入蒸汽灭菌锅中进行高温高压灭菌,灭菌时间可延长达25min—30min。 干热灭菌法——即将玻璃器皿置入电热烘箱中进行灭菌。 煮沸灭菌——即将玻璃器皿放入水中煮沸进行灭菌。
柑橘脱毒方法?
植物脱毒是利用高温处理,茎尖组织培养等方法脱除植物所感染的病毒,在超净无菌的条件下培养不带病毒的动植物株,进行营养繁殖,快速繁育和生产出无病毒的种苗,提高品质与产量,复壮种苗缩短繁种周期,节省种子费用及不受季节限制和生产脱毒苗等优点.有三种方法:热处理法,组织培养法,微体嫁接法.这三个中我学过的是组培法,组织培养脱毒法还可依据所选材料不同分为:微茎尖培养,愈伤组织培养,珠心组织培养脱毒.热处理一般不单独使用。
魔芋脱毒方法?
加入石灰水可以脱毒。
去除魔芋毒性需要加石灰水漂煮三个小时,传统的魔芋加工方法就是将魔芋磨成粉后,将其加入放有碱水的锅中煮开,一般需要煮3个小时以上,煮熟后捞出切成大块,放在凉水中浸泡;炒菜时拿出来切好烹饪即可。
甘蔗脱毒有几种方法?
甘蔗脱毒方法:
甘蔗健康种苗理论上是指不带任何甘蔗病原菌的种苗,实际生产中是指不带主要病毒和细菌且遗传上表现一致的种苗。目前国际主要蔗糖生产国如巴西、澳大利亚、印度等已在生产上大面积应用。
为保证温水处理甘蔗种苗的发芽率,应仔细选择生长健壮的成熟中下部蔗茎,先去除蔗叶避免阻塞水流循环系统,再将甘蔗种苗砍成带有2—3个芽段,然后将砍好的甘蔗种苗装入网袋堆放于处理吊蓝内。在流动冷水中浸泡48h之后,采用甘蔗温水处理设备进行温水(50±0.20C)脱毒处理2h,计时从甘蔗种苗放入处理池开始。如果处理超过2小时意味着发芽率的降低,保持处理温度在(50±0.20C)对脱除病毒和发芽率都是必要的。
处理时首先将处理池水温加热到51—52℃,放入装有甘蔗种苗的吊蓝,使其完全浸没。装有甘蔗种苗的吊蓝放入处理池时,池内温度下降很快回到50℃。温度自控器实时监测池内温度并反馈信号给加热器以确保池温在50±0.2℃。巡检仪监测池内上、中、下部各层的温差。
热处理脱毒结合茎尖培养脱毒有哪些优点?
热处理可以钝化病毒而扩大茎尖的无病毒区,茎尖具有取较小的顶端分生组织即可培养出完整植株的优点。
将热处理与茎尖分生组织培养结合起来,则可以切取较大的茎尖培养获得脱毒植株,从而不仅克服了单纯热处理后嫩梢嫁接技术要求高的限制,而且也解决了常规茎尖培养取材小而成活率低的问题。
尤其是对于那些用单纯一种方法难以脱除的病毒,这种结合脱毒的方法可明显提高脱毒效果。
热处理可在切取茎尖之前针对母株进行,即从热处理之后的母体植株上切取较大的茎尖(长约0.5mm)进行培养获得脱毒个体。
另一条途径是先进行茎尖培养,然后再对试管苗进行热处理,从而获得较多的无病毒个体。热处理结合茎尖培养脱毒法的不足之处是脱毒时间也相对延长。
草莓脱毒苗有哪些优点?
脱毒草莓是取其分生区细胞先脱分化成具有全能性的愈伤组织,然后进行体外细胞培养,长成植株后再种,这样的草莓由于不产生毒素影响自己生长,所以可以长的更大不易烂。
一般作物的脱毒苗都是当季栽培,收获后。需要使用新的脱毒苗种植下一茬。所以一般脱毒苗栽培都是一次性的。如果是还在培养箱中的脱毒苗,就可以进行扩繁增值,多年使用。
种植脱毒红薯种苗有哪些优点?
禾下土经过多年的实验与推广脱毒苗的经验,总结出脱毒苗的优势如下:
1、 增产效果明显 与相同品种的普通甘薯相比,脱毒甘薯的增产幅度可达20%~200%,具体增产幅度依品种对病毒感染的耐性差异而不同,病毒感染越严重,脱毒后增产幅度越大。
2、 生长势增强 甘薯经过脱毒以后,地上部生长势明显增强。田间春栽或夏栽均表现还苗快,茎节粗短,叶片肥厚,生长势旺,叶面积系数增加,茎分枝数增加。
3、 品质提高 脱毒甘薯的品质性状优于普通甘薯,薯皮光滑,色泽鲜亮,薯块整齐,切干率和出粉率提高1%以上。并且育苗时较普通甘薯提早2~3 d出苗,产苗量增加15%~35%,百苗重增加20%以上,苗粗壮,质量好。
4、减少多种病害发生 脱毒甘薯不仅脱去了病毒,通过茎尖培养还去除去了多种真菌、细菌、线虫(黑痣病、黑斑病和茎线虫病)等病原菌,使其发生的几率大大减少。
脱毒苗的培养方法?
1.热处理脱毒:在稍高于正常温度的条件下,使植物组织中的病毒可以油分或完全地钝化,而较少伤善甚全不伤害植物组织,实现脱除病毒。
2.茎尖培养法:在植物体中,病毒的移动主要有两条途径,其一是维管组织,而茎尖分生组织中没有维管束系统;其二是胞间连丝,但病毒在这条途经中的移动速度落后于茎尖生长速度,因此顶端分生组织附近病毒浓度很低,甚至不带病毒。根据这一原理,利用茎尖培养可以获得无病毒种苗。
3.茎尖培养与热处理相结合脱毒法:单纯的热处理与单纯的茎尖培养均不能完全脱除病毒,且条件要求高,操作困难,为了提高茎尖脱毒效果,可以先进行热处理,再进行茎尖培养脱毒。
4.化学药剂处理脱毒。
种苗脱毒技术主要方法?
第一种是高温脱毒:50度的热水中浸泡10分钟~数小时,适用于休眠器官、接穗或种子。
第二种热空气处理:在温热箱内,35~40℃,几十分钟~数月。对茎尖效果较好,热处理后取较大茎尖培养,可提高成活率与脱毒率。注意:易受伤,掌握温度与时间。