羊肚菌原种接栽培种需要多少克？

需要10克

(1)母种的制作及培养

①制作母种培养基:将250g土豆,30g琼脂,25g葡萄糖和3g维生素B放入2000m1

的水中加热，直至琼脂完全煮化即得母种培养基；

②培育母种:取所述母种培养基 200ml装入300ml的试管中，用棉花塞住管口，将所述试管放在125℃的高压灭菌锅内灭菌1. 5h冷却至室温后，将所述试管放入密封的无菌接种箱中，每个试管中接入1cmX 1cm的菌丝后，置于20℃培养箱中，直至生长成母种。

在步骤(1)中，土豆需要预先放入水中煮半小时，之后将其捞山，再与琼脂、葡萄糖、维生素B一起放入水中煮，直至琼脂煮化，将煮好的培养基放在试管里，等凝固之后，再用棉花寒住试管的管口。进行母种的培育时，在将试管放入接种箱之前，还需要用75%的酒精擦拭试管，对试管的外壁进行洒精消毒。

在将试管放进无菌接种箱内时，还需要将用于接种的下其一同放进接种箱的，如:托盘、酒精灯、打火机、器皿、接种钩、镊子等一起放入接种箱内进行消毒处理.对于接种箱内的消毒处理，可以将装有高锰酸钾和甲醛混合物的被子放入接种箱内，消毒时保证接种箱的密封。

(2)原种的制作及培养

①制作原种培养基:以质量分数计，取小麦80 %、木销10%和麦麸10%，将所述小麦煮熟后捞出，与所述木销和麦数搅拌均匀，水分控制在60-80 % ,装入培养瓶中，瓶口用棉花塞住，将所述培养瓶放在火菌锅里火菌后，100℃下保温6小时，取出冷却后即得原种培养基；

②培育原种:将所述培养瓶和装有母种的试管放入接种箱中密封半小时后，再将试管中的毋种接入到所述原种培养基的培养瓶中，保持温度20℃即可。

(3)较培中的制作及培养

①制作栽培种培养基:以质量分数计，取小麦75%煮熟后捞出，放入15%木销、

5%麦麸和5%泥上搅拌均匀，含水量60% -80%.装入聚丙烯袋中封口，将所述聚丙烯袋放在灭菌锅里灭菌.常压100℃下保存4小时，取出冷却至室温:

②培育栽培种:将所述聚丙烯袋和原种培养基的培养瓶置于接种箱中密封半小时后，再将步骤(2)培养的原种接入到所述聚丙烯袋巾，在20℃环境下培养15-20天可获得栽培种。

在上述的步骤(1)之前，还需要采集新鲜的羊肚菌子实体，将子实体切成直径

2-3mm的菌块，取经过高压灭菌的PDA培养纂，将所述菌块放在PDA培养基上，将所述PDA培养基置于20℃的培养箱中，，周后可获得菌丝。